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SAT-RNA检测病原体时代到来

2017-09-30      编辑:李大人
导读
通过对几位老师的专访,我们初步了解了SAT这种新一代的病原体检测技术,那么,以下是小编根据受访者阐述所整理的关于SAT检测技术的相关内容,主要围绕SAT技术在病原体RNA检测中的优势及…
 

通过对上述几位老师的专访,我们初步了解了SAT这种新一代的病原体RNA检测技术,那么,以下是小编根据受访者阐述所整理的关于SAT检测技术的相关内容,主要围绕SAT技术在病原体RNA检测中的优势及其临床应用来展开。

什么是SAT技术?

实时荧光核酸恒温扩增技术(简称SAT技术)由靶标RNA在RT酶作用下逆转录合成一条带T7启动子的双链DNA,T7 RNA聚合酶以这条双链DNA为模板进行转录,以每分钟100-1000个拷贝的速度不断地合成RNA。合成出的RNA与分子信标结合,发出荧光,可以被荧光检测仪检测到。与此同时,新合成的RNA继续在RT酶和T7 RNA聚合酶的作用下循环逆转录和转录的过程。如此往复,以达到高效扩增的目的。


SAT扩增原理图

SAT技术检测靶标为RNA,起始模板多拷贝,灵敏度高;因为RNA易降解,不易产生交叉污染;并且可以鉴别死菌、活菌,可以辅助判愈。此技术采用特异性靶标捕获技术-磁珠提取法,提取纯度高,结果准确;42℃恒温扩增的方式,程序简单,无需热循环,仪器损耗小,设备成本低;扩增时间仅需40-60min,高效快速。


目前常用实验室病原体的检测方法学比较


培养法、血清学检测方法和分子生物学检测方法是目前常用的几种实验室病原体检测方法。


传统培养法:特异性高,但是灵敏度低,耗时长。

血清学检测方法:耗时短,灵敏度较高,但是存在窗口期,易出现假阴性;

分子生物学检测方法:传统的PCR方法检测的是DNA,DNA可长期存在于死亡的病原体内,容易引起交叉污染产生假阳性。


SAT技术检测是RNA,RNA在环境中极不稳定,容易降解,大大降低了交叉污染引起的假阳性问题。同时,由于在死亡的病原体中RNA快速降解,SAT技术还可用于临床用药后的疗效监测及判愈。SAT技术将病原体RNA扩增后再行检测,单个菌体中RNA拷贝量(约104)显著高于DNA(1个或几个),灵敏度较PCR更高。在对生殖道感染的病原体检测应用方面,此技术既可以泌尿生殖道分泌物为检测样本,同时也具备了以尿液为检测样本的条件,而尿液属非侵入式取样,可由受检者自行取材,既能减少医生的工作量,又可避免拭子取样的痛苦。
 
基于SAT技术的分子诊断产品可广泛应用于临床检测、血液筛查、食品安全检测、传染性疾病的应急防控和快速反应等多个领域,值得广泛推广。
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