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脑脊液里的真假细菌

2017-11-23  来源:检验视界网  作者:俞晓晨  编辑:李大人
导读
作者:哈尔滨医科大学附属第一医院 俞晓晨在微生物室轮转也有四个多月了,对于大部分的日常工作都能较好的胜任了。但总觉得涂片直接检查脑
作者:哈尔滨医科大学附属第一医院 俞晓晨

在微生物室轮转也有四个多月了,对于大部分的日常工作都能较好的胜任了。但总觉得涂片直接检查脑脊液中的细菌有点棘手。通常而言未经培养的脑脊液大多细菌量很少,当细菌量特别少时,对于我们这些新手而言,有时反而不敢确认是否是细菌还是杂质。总体而言我们医院在未经培养的脑脊液中查到细菌的概率比较低,但这个结果对病人而言至关重要。不管是假阳性还是假阴性都是病人不可承受之重,所以我对这些标本的判读都是慎之又慎。

这天看了两个脑脊液的革兰染色片子,是前一天下午送来的标本。按我们科常规,下午送来的脑脊液需及时接种,但涂片结果可以第二天上午报告。镜下这两个脑脊液涂片中全是弯弯曲曲的,形态貌似革兰阴性杆菌,但又不太像,而且似乎在“菌体”两侧有毛茸茸的细丝(图1)。我看了一下病人信息一个是基底节出血,另一个是脑室肿瘤。一般来说,这种情况脑脊液中出现细菌的几率很小,几乎不可能出现如此大量的细菌,而且两张片子镜下如此相像,不可思议。我让我们科室的权威陈老师看了一下,陈老师调了好几个视野,肯定的说“不是细菌,看不出来菌体结构”。“那镜下的这些是什么呢?”我疑惑的问。脑脊液中除了会有细胞外,怎么会出现如此多杂质。陈老师想了一会儿,去培养箱中看了一下接种的该脑脊液标本,笑着说“是棉签上的纤维,估计是拿棉签涂的标本。”我在超净台中打开平板一看,的确如此(图2)。应该是前一天下午值班的老师一时没有顾上实习生,她按照我们痰液的接种方法给接种的标本,也顺便用棉签进行了涂片。

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图1
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图2

用棉签来涂脑脊液标本自然是错误的,那脑脊液到底该怎么涂呢?我们一直的做法是对于脓性脑脊液,不离心,直接培养和涂片;对于澄清的脑脊液,3000r/min离心15min后,去上清,混匀后,滴2d在培养基中,进行四区画线培养,涂片也是直接滴到玻片上,用接种环摊平。另外我也查阅了王辉老师等主编的《临床微生物学检验》。在第十六章 中枢神经系统标本的检测流程中两处提到了脑脊液标本的处理方法,我总结如下。涂片:混浊或脓性脑脊液可直接涂片,染色镜检。无色透明的脑脊液,应以3000r/min离心10-15min,取沉淀物涂片或采用细胞离心机进行甩片,做革兰染色、抗酸染色等显微镜检查。培养:用无菌滴管取混浊脑脊液或经离心后的沉淀物,分别接种于增菌肉汤、血琼脂平板、巧克力琼脂平板上,置35℃,CO2环境中培养18-48h,观察有无细菌生长。无菌滴管的使用,能够尽量避免管口的污染。从我们科的脑脊液培养阳性率来看,通过血培养瓶增菌后,再转种平板后阳性率大大提高。所以建议临床优先考虑打入血瓶进行培养。

上述案例中,由于标本处理不到位,给我这样的初学者造成了一定的困扰,而陈老师经验丰富,一眼识破假象,并能找出原因,让大家非常佩服。微生物室是检验科中比较繁忙的科室,实习生、进修员给我们提供了很大的援助。但由于对科室工作流程的不熟悉,偶尔会发生错误。我们除了进行有效的培训,在工作中还应该“放手不放眼”,及时发现和纠正错误。另外对于犯了错误的实习生,批评教育时语言要和蔼,对事不对人,更不能进行人身攻击。不然某些实习生由于害怕批评,可能会出现错误不报的情况,造成无法挽回的损失。正如我们主任经常教导我们的“善待实习生,善待进修员”,其实也是从另一层面保障我们的检验质量。而我这样的初学者,多向科室老师学习,对于自己的薄弱环节多加练习,相信能很快成长为一个合格的检验师。

参考文献

[1] 临床微生物学检验,王辉、任建康、王明贵主编。
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